Цитологическое исследование препарата шейки матки

Содержание

Противопоказания

Кроме, обнаружения видоизменённых клеточных структур, и определения предракового состояния данный вид анализа может использоваться как метод дополнительной диагностики внутриклеточных изменений.

Он назначается:

  • Девушка сидитДля выявления аномалии развития клеток в тканях организма.
  • Для определения характера патогенной микрофлоры.
  • Для установления причины изменения цикличности месячных.
  • Для установления патологий, которые вызываются папилломавирусом.
  • С целью выявления неспособности женщины к зачатию ребенка.
  • Для определения патологии эпителиального слоя шейки матки.
  • Для установления причины кровянистых влагалищных выделений.

https://www.youtube.com/watch?v=xG9l68fwKCQ

Также этот вид анализа назначается:

  • Перед планируемой беременностью.
  • При частых родовых процессах.
  • Если роды произошли в раннем возрасте (рожавшей не было 18 лет).
  • Перед наступлением климакса.
  • Перед введением противозачаточной спирали.
  • Если женщина не обращалась в женскую консультацию больше 3 лет.
  • Если визуальный осмотр шейки матки при помощи влагалищного зеркала вызывает сомнение по поводу здоровья этого органа.
  • При положительном анализе на ВИЧ-инфекцию.
  • При генетической отягощенности (болезнь близких родственников онко заболеваниями).

Если при проведении цитологического исследования возникает подозрение на наличие опухоли, пациентке необходимо проходить этот вид обследования не реже двух раз в год.

Понимая, что многие женщины не относятся к своему здоровью всерьез и не проведут анализы цитологического исследования без причины, врачи сформулировали ряд признаков, обнаружив которые у себя, женщина должна незамедлительно отправиться на анализ. Среди этих признаков выделяют:

  • Любые воспалительные процессы в репродуктивных органах;
  • Нарушения менструального цикла, сохраняющиеся на протяжении нескольких месяцев;
  • Репродуктивные проблемы;
  • Планирование беременности или установки спирали для ее предотвращения;
  • Прием любых гормональных препаратов;
  • Сахарный диабет;
  • Ожирение;
  • Поражение организма такими вирусами, как папилломы или генитальный герпес;
  • Активная сексуальная жизнь, являющая собой незащищенный секс с непроверенными партнерами.

Любого из данных признаков достаточно, чтобы женщина отложила все дела в дальний ящик, и отправилась в ближайший медицинский центр на прохождение цитологии. Врачи призывают потенциальных пациенток не ждать, пока их состояние ухудшится, и возникнут первые болевые симптомы болезни.

Несмотря на то, что врачи считают исследования мазка безопасным и безболезненным, для него существует целый ряд противопоказаний:

  • Мазок из половых органов женщины (включая пробу из влагалища или шейки матки) не может быть взят во время менструации;
  • Нельзя осуществлять анализ при наличии воспалительной реакции во влагалище и шейки матки. При развивающейся инфекции в крови возрастает количество лейкоцитов, которые окажут влияние на итоги теста.

В зависимости от возраста женщины необходимо проводить плановый цитологический анализ мазка с такой регулярностью:

  • в 21-49 лет — 1 раз в 3 года;
  • в 50-65 лет – 1 раз в 5 лет.

Помимо планового осмотра, анализ для предупреждения рака шейки матки назначается в таких случаях:

  • эрозия;
  • бесплодие;
  • инфекция герпеса во влагалище;
  • сахарный диабет;
  • вирус папилломы человека (ВПЧ);
  • при выделениях из влагалища;
  • нарушение менструального цикла;
  • при планировании беременности;
  • перед установкой спирали (ВМС);
  • через 1-3 месяца после родов.

Противопоказано проводить забор биологического материала для цитологических исследований в таких случаях:

  • во время беременности, особенно, после 20-й недели цитологический мазок не производится, так как вмешательство в шейку матки может негативно отразится на состоянии плода;
  • при менструальном кровотечении;
  • при цервиците;
  • при наличии кольпита (вагинита) – воспалении слизистой оболочки влагалища.

Результаты исследования цитологического анализа, сделанного во время воспалительных процессов половых органов, могут показать ложноположительный или ложноотрицательный результат онкоцитологии.

  • Нарушения менструального цикла;
  • Заболевания вирусной природы (ВПЧ – вирус папилломы человека, вирус герпеса 1 и 2 типа – генитальный герпес);
  • Бесплодие;
  • Эрозия, гиперплазия или эктопия шейки матки;
  • Боли шейки матки;
  • Патологические выделения из половых путей;
  • При планировании беременности;
  • При обращении в женскую консультацию при беременности;
  • Выявление патогенной микрофлоры (кокки, бактерии вызывающие заболевания передающиеся половым путем);
  • Скрининг всех женщин после 21 года.

Что такое цитологическое исследование шейки матки и цервикального канала?

Цитологическое исследование – это метод лабораторного исследования в медицине, при котором оценивают морфологические характеристики клеточных элементов в цитологическом препарате для определения наличия или отсутствия опухолевого процесса и других изменений. Исследование проводят с помощью микроскопии биоматериала полученного и подготовленного специальными методами.

  • скрининга (массового обследования) пациенток;
  • для установления или уточнения диагноза;
  • контроля лечения уже известного заболевания;
  • раннего выявления излечиваемых заболеваний.

При проведении цитологического исследования, есть возможность попутно провести микробиологическую диагностику. На ее основании нельзя поставить окончательный диагноз, но можно заподозрить инфекционные заболевания половых путей.

  • Трихомонадный кольпит – при обнаружении трихомонад;
  • Кандидоз (более известная, как молочница) – при обнаружении грибов рода Candida;
  • Бактериальный вагиноз – снижение лактофлоры (нормальная флора влагалища), обнаружение кокков, гонококков, палочек или смешанной флоры;
  • Хламидиоз – обнаружены хламидии;
  • Изменения эпителия под воздействием ВПЧ.
  • Микробиологический метод – посев флоры с последующим определением вида возбудителя и его чувствительности к антибактериальным препаратам;
  • ПЦР – диагностика (полимеразная цепная реакция) – современный метод диагностики, основанный на определении ДНК возбудителей инфекционных заболеваний.

Внеплановая цитология шейки матки

При кольпоскопии, обычно берется два мазка:

  1. Осуществляется забор материала непосредственно из цервикального канала.
  2. Влагалищный мазок позволяющий установить наличие патогенной микрофлоры.

В некоторых случаях происходит внеплановое назначение этого вида исследования. Оно происходит в следующих случаях:

  • Анализы крови на ВИЧЕсли существует подозрение на наличие папилломавируса, или полового герпеса.
  • Влагалищные выделения неясной этиологии.
  • Расстройство месячных, их удлинение или задержка.
  • Обильные маточные кровотечения.
  • Подозрение на ВИЧ инфекцию.
  • Если женщина желает установить внутриматочную спираль.

Анатомия

За большими и малыми половыми губами располагается преддверие влагалище, за которым непосредственно находится влагалище. Оно представляет собой полый мышечный орган, расположенный в малом тазу. Влагалище занимает положение между мочевым пузырем и уретрой спереди и прямой кишкой сзади. Дистальным концом прикрепляется к шейке матки.

Шейка матки – анатомическое образование в нижнем сегменте матки. Цервикальный канал шейки – анатомическое сквозное отверстие, которое проходит через середину шейки и непосредственно соединяет ее и влагалище. Он может отсутствовать при неправильном эмбриогенезе, такое состояние называют атрезией. В норме канал шейки матки заполнен слизью, которая защищает матку от проникновения микроорганизмов и других чужеродных агентов.

Чтобы понять сущность цитологического исследования, необходимо понимать, что на разных участках полового тракта органы покрыты разным эпителием. На поверхности влагалища и влагалищной части шейки матки находится неороговевающий плоский многослойный эпителий, а в цервикальном канале – цилиндрический.

Что показывает цитология?

Результат цитологии шейки матки можно разделить на положительный и отрицательный:

  • Положительный анализ свидетельствует о том, что в ткани шейки матки обнаружены атипично изменённые клеточные включения. Они имеют изменённую морфологическую структуру, форму, и могут наблюдаться в разном количестве.
  • При отрицательном результате клеточные изменения не обнаруживаются, это показатель нормы.

Цитологическое исследование препарата шейки матки

Изменение в строении клеток разделяют на 5 стадий:

  • Стадии рака маткиСтадия 1. Картина исследования не вызывает опасений, находится в пределах нормы.
  • Стадия 2. Воспалительный процесс находится в пределах относительной нормы. Количество видоизменённых клеток сравнительно малое. Это служит поводом для назначения дополнительных диагностических мероприятий.
  • Стадия 3. При исследовании могут обнаруживаться клетки с изменениями ядра или цитоплазмы. Такой результат не является отклонением от нормы. Чаще всего он является фактором риска, что у женщины может возникнуть онкопатология. В этом случае происходит обязательное назначение гистологического исследования.
  • Стадия 4. Свидетельствует о начальном перерождении в атипичную форму малого количества клеток. Происходит выраженное изменение ядра, хромосомы, и клеточного содержимого. Обязательно требуется повторное назначение цитологического и гистологического анализа.
  • Стадия 5. Характеризуется большим уровнем видоизмененных клеток, это является поводом для проведения комплексного обследования, и назначения соответствующей терапии.

Онкозаболевания шейки матки (90% от всех случаев) поражают многослойный эпителий, гораздо реже, в патологический процесс вовлекается железистый слой.

В связи с этим происходит забор следующего материала:

  1. КлеткиБерутся клетки цилиндрического эпителия в области канала шейки матки (эндоцервикальные клетки).
  2. Производится забор плоских эпителиальных клеток с влагалищной стороны шейки матки (эктоцервикальные клетки).
  3. Будут брать клетки, которые образуются в области стыка цилиндрического и плоского эпителия так же подвергаются цитологическому исследованию.
  • Нормальный результат – нет измененных клеток, возможны явления кандидоза или бактериального вагиноза. Можно обнаружить неизмененные эпителиальные клетки, умеренное количество нейтрофилов, лейкоцитов и бактерий;
  • Обнаружение неопределенных атипичных клеток – такие изменения вызывают инфекции передающиеся половым путем, ВПЧ, дисплазия, постменопаузальная атрофия поверхности слизистой. Необходимо сдать анализ на наличие ВПЧ и пройти цитологию повторно через год;
  • Низкая степень изменения плоского эпителиального покрова – возможна дисплазия или инфицирования ВПЧ. Рекомендации те же;
  • Наличие атипичных клеток – предрак 2-3 степени или начало злокачественного процесса. Для дальнейшей диагностики проводится кольпоскопия (осмотр стенок влагалища и видимой части шейки матки при помощи специального оптического прибора);
  • Высокая степень плоскоклеточных изменений – высокий уровень дисплазии, возможен рак шейки матки. Необходимо провести кольпоскопию, биопсию тканей, если возраст женщины старше 25 лет, возможно проведения диагностической эксцизии (удаление части слизистой с дальнейшей гистологией ткани);
  • Наличие атипичных железистых клеток – дисплазия эпителия 1-3 степени, рак шейки матки или эндометрия. Рекомендации – кольпоскопия, диагностический кюретаж матки и цервикального канала матки, анализ ВПЧ;
  • Аденокарцинома in situ (на месте), плоскоклеточная карцинома – высокая степень дисплазии или раковые изменения шейки матки. Назначаются кольпоскопия, диагностический кюретаж матки и цервикального канала матки, анализ ВПЧ;
  • Доброкачественные железистые изменения – гиперплазия эндометрия. Если у женщины до менопаузального периода нет неменструальных кровотечений, миомы матки или прочих патологических процессов, то такие изменения можно отнести к норме.

Как подготовиться в цитологии шейки матки?

Для достижения достоверности анализа необходимо выполнить ряд мероприятий по подготовке перед проведением данной процедуры.

Для этого необходимо:

  • Девушка в красных трусах и цветокНа протяжении 2 дней, до проведения цитологического исследования, нужно готовиться и полностью исключить сексуальные контакты.
  • За один день до проведения манипуляции не делать гигиенических подмываний и спринцеваний.
  • Не пользоваться ванной, а использовать только душ.
  • Исключить употребление гигиенических спреев, гелей, тампонов, вагинальных суппозиториев, любых таблетированных форм. Так как их применение может отрицательно повлиять на достоверность анализа.
  • Непосредственно перед проведением манипуляции не мочиться на протяжении 2 часов.
  • За несколько дней отказаться от употребления антибактериальных препаратов, противовоспалительных средств, противозачаточных контрацептив.
  • В случае обнаружения инфекции, сдавать мазок можно только после полного выздоровления, спустя 10 дней.
  • Этот вид анализа не проводится при месячных, так как он будет плохой и не будет показывать признаки заболевания. Его назначают за 5 дней до наступления менструации, либо после 5 дней по окончании цикла.

Подготовка к исследованию

Для достоверности результатов ПАП-теста цитологическим методом необходимо придерживаться некоторых правил подготовки к процедуре.

Прежде всего, исключают нарушение микрофлоры влагалища за 48 часов до проведения мазка. Для этого следует прекратить использование средств интимной гигиены, препаратов для вагинального использования (свечи, спринцевания), а также исключить сексуальные контакты. Непосредственно перед процедурой исключают посещение туалета за 2-3 часа.

Как, правило, цитологический анализ производится после лечения бактериальных инфекций. Если накануне было осуществлено гинекологическое обследование или кольпоскопия, то мазок на цитологию производится не ранее, чем через 2 дня.

3.1 Сотрудники гинекологических и смотровых кабинетов ЛПУ, направляющие цитологический материал для исследования, должны быть информированы о том, каким методом осуществляют пробоподготовку [ЖЦ или традиционная (классическая) цитология] гинекологического материала в лаборатории, так как это влияет на выбор способа забора, хранения и транспортирования материала.

Материал для исследования следует забирать, готовить и транспортировать в лабораторию с учетом требований метода, используемого лабораторией.Материал с шейки матки забирают с помощью одноразовых щеток различного типа (см. рисунки 1-2). Для получения более информативного материала рекомендуется использовать два вида щеток сervex-brush и цитощетки различных типов.

Рисунок 1 – Цитощетка или щеточка цервикальная

Цитощетка должна быть со щетинками, расположенными под углом 90°. При заборе материала ее следует поворачивать на 90° не менее двух раз.

Рисунок 2 – Комбинированная щеточка, cervex-brush

Комбинированная щеточка используется для одномоментного получения материала из цервикального канала и влагалищной части ШМ. При заборе материала следует сделать пять оборотов по часовой стрелке.При невозможности использования щеток или при использовании методов классической цитологии допустимо использование традиционных способов получения материала.

Рисунок 3 – Шпатель Эйра

При заборе делается полный оборот шпателя с легким надавливанием.

Рисунок 4 – Кюретка для получения материала цервикального канала

Использовать для забора материала ватный тампон и другие приспособления недопустимо.

3.2 Материал нужно получить со всей зоны трансформации (зоны стыка или переходной зоны). Непосредственно само получение материала для исследования с шейки матки (без учета времени на осмотр) занимает около 5 мин, процедура безболезненна и может проводиться амбулаторно.

_______________

Зона трансформации – гистологический термин, обозначающий участок слизистой оболочки шейки матки в том месте, где многослойный плоский эпителий, характерный для влагалищной части шейки матки, переходит в цилиндрический эпителий канала шейки матки (цервикального канала).

3.3 Получение материала для исследования может быть отложено, если у женщины:- менструация;- острое воспалительное заболевание половых путей;- беременность.

Цитологическое исследование препарата шейки матки

4.1 Метод получения материала и приготовления препаратов, который будет использован в каждом конкретном случае, должен быть заранее четко согласован между лабораторией и отделением ЛПУ, что должно быть отражено в соответствующем документе.

4.2 При использовании метода классической цитологии материал после получения помещают на предметное стекло путем нанесения и равномерного распределения (размазывания) биологического материала вдоль стекла, избегая чрезмерного механического воздействия (чтобы не раздавить клетки). Одновременно с этим необходимо стремиться к получению тонкого монослоя.

Материал с шейки матки и материал из цервикального канала помещают на разные стекла, маркируемые соответственно нанесенному материалу.Препараты подсушивают в течение нескольких минут на открытом воздухе (при использовании методов окраски по Паппенгейму, по Лейшману и др.) и могут транспортировать в лабораторию.При использовании метода окраски по Папаниколау препараты требуют немедленной фиксации.

4.3 При использовании метода ЖЦ полученный материал необходимо немедленно перенести в транспортную жидкость в емкость – виалу, отделив саму щетку от рукоятки (если производителем щетки не предусмотрено иное), и герметично закрыть виалу с целью исключения возможности проливания и испарения содержимого.

4.3.1 Следует сразу же маркировать (подписать) виалу, используя простой карандаш, ручку (при наличии этикетки) или перманентный маркер.

4.4 При маркировке указывают фамилию, имя, отчество пациентки и/или еe ID (в том случае, если сотрудник, получающий материал для исследования у пациентки, и лаборатория используют единую информационную систему). Возможно применение штрих-кодов и номеров, присваиваемых исследованию информационной системой, если используется штрихкодирование. В любом случае маркировка должна быть четкой, читаемой, надежно закрепленной на виале, не смываемой водой.

4.5 Абсолютно недопустимым является:- использование для маркировки препаратов стеклографов, карандашей старого образца, водных маркеров;- отправка для исследования немаркированного материала;- отправка материала без сопровождающих документов;- отсутствие в ЛПУ документально оформленного “прикрепления” к конкретной лаборатории, с указанием согласованных взаимных правил и требований, касающихся получения материала, приготовления препаратов, оформления, доставки материала для исследования, сроков доставки, повторных исследований, сроков проведения исследования и предоставления заключений и отчетов, порядка направления пациенток с выявленной патологией для обследования и лечения в другие ЛПУ и т.п.

Сотрудник, отвечающий за этот этап работ, должен проверить соответствие представленного материала записи о нем в сопровождающем документе.

5.1 Материал, направляемый в лабораторию, сопровождается заполненным направлением на исследование (см. приложение А).

5.2 В направлении, прилагаемом к материалу, должна быть как минимум следующая информация:- фамилия, имя, отчество пациентки;- дата рождения;- номер истории болезни/амбулаторной карты/другой номер, идентифицирующий пациентку;- наименование запрашиваемого исследования (например, “направляется на цитологическое диагностическое исследование)*;

_______________

* Текст документа соответствует оригиналу. – Примечание изготовителя базы данных.- причина обследования (указать диагноз или, например, “профилактический осмотр”, “онкопоиск”);- дата последней менструации, продолжительность менопаузы;- количество виал с материалом и данные, какой материал в них содержится (например, соскоб с эндоцервикса, эктоцервикса), в случае штрихкодирования виал эту информацию указывают в направлении напротив каждого штрих-кода;

5.3 Направление может быть оформлено в электронном виде при наличии ЛИС и должно давать доступ к указанной информации в рамках прав доступа каждого конкретного медицинского работника.

5.4 Порядок сбора материала из ЛПУ для отправки в цитологическую лабораторию должен быть четко согласован между отделением ЛПУ и лабораторией и прописан в соответствующем документе.

Цитологическое исследование препарата шейки матки

6.1 Прием материала должен осуществлять ответственный сотрудник лаборатории, назначенный заведующим лабораторией или лицом, его замещающим, под подпись с указанием даты и времени доставки.Порядок доставки и приема также должен быть согласован между отделением ЛПУ и лабораторией, что должно быть оформлено документально.

6.1.1 Лаборатория может отказаться от приема материала в том случае, если:- отсутствует или не оформлена надлежащим образом сопровождающая документация;- не маркирован материал;- констатируется нарушение сохранности (целостности, герметичности) упаковки;- очевидно нарушение условий сбора, хранения и/или транспортирования.

6.1.2 Отказ в приеме материала с указанием причины фиксируют в отдельном журнале и заверяют подписями представителей обеих сторон._______________Приказ Министерства здравоохранения СССР от 4 октября 1980 г. N 1030 “Об утверждении форм первичной медицинской документации учреждений здравоохранения” (с изменениями на 31 декабря 2002 г.).

6.1.3 Регистрацию осуществляют в ЛИМС или при отсутствии информационной системы в бумажном журнале регистрации материала (см. приложение Б).

6.1.4 Форма журнала может быть свободной, но с указанием всех параметров исследования и с наличием всех граф, имеющихся в направлении.

Приложение Б(рекомендуемое)

Б.1 Обязательные поля:- дата поступления материала;- номер исследования;Примечание – Указывают в диапазоне в зависимости от количества препаратов. Далее ставится знак “/” (например, для пяти препаратов, поступивших 1 января 2002 г. первыми, номер будет 1-5/02, следующие два препарата – (6-7/02).- первично/повторно;

– отделение (учреждение), приславшее материал;- N истории болезни или ID;- лечащий врач (ФИО, тел.);- ФИО больного (полностью);- пол;- дата рождения;- диагноз (при направлении на цитологическое исследование), код по МКБ-10;- важнейшие клинические данные;- метод получения материала;- откуда получен материал;

Как проводится цитология шейки матки?

Для проведения этой процедуры используют только стерильный инструмент.

Для этого применяется:

  • Шпатель Эйра. С помощью него производится забор материала из влагалища и верхней части шейки матки.
  • Эндобраш. Специальный зонд для забора материала из цервикального канала.
  • Стерильная щеточка.
  • Анатомический пинцет.
  • Зеркало гинекологическое.
  • Ложечка Фолькмана для проведения соскоба с шейки матки.

Забор материала на цитологическое исследование, производится врачом гинекологом.

Шпатель Эйра

Для этого:

  1. Женщина ложится на гинекологическое кресло, предварительно сняв нижнюю одежду до пояса.
  2. Для полной визуализации вводится вагинальное зеркало.
  3. В просвет шеечного канала, приблизительно на 2 см, водится стерильная щеточка для сбора ткани эндоцервикса. Взятый материал помещают на специальное предметное стекло, которому присваивают определенный код или номер.
  4. При помощи шпателя Эйра производится соскоб в области перехода цилиндрического в плоский эпителий. Так же содержимое помещается на стекло, и маркируется.
  5. Чтобы взять материал с участка эктоцервикса, необходимо взять новый стерильный шпатель. Биоматериал помещается на отдельное предметное стекло.
  6. После этого мазки обрабатываются специальным раствором, высушиваются, и отправляются для дальнейшего лабораторного изучения под микроскопом.

Для проведения данного вида исследования достаточно 15-20 минут.

Проведение процедуры

Сначала врач акушер – гинеколог производит осмотр влагалища и шейки матки в зеркалах-расширителях и оценивает состояние слизистых оболочек, пальцевое гинекологическое обследование до мазка делать не следует. Если эпителий покрывает большое количество слизи, ее необходимо удалить. Затем производят соскоб с шейки матки (экзоцервикс), для этого используют шпатель Эйра.

После него берут соскоб из цервикального канала (эндоцервикс), производят забор материала с помощью специальной цитощетки (Cervix Brash). Ее вводят в канал, производят 4-5 циркулярных движения. После взятия полученный материал наносят на стекло, мазок высушивают на воздухе и фиксируют спиртом или специальным препаратом (для исследования по Папаниколау).

Следующий этап исследования – лабораторный. Лаборанты регистрируют полученные образцы. Затем производят окрашивание мазков специальными красителями (по Лейшману). Препараты для жидкостной цитологии центрифугируют или фильтруют.

  • Тип клеток;
  • Размеры клеток;
  • Включения в клетках;
  • Зрелость;
  • Особенности и изменения ядер;
  • Цитоплазма.

После оценки результатов лаборатория выдает заключение, которое отправляется лечащему врачу.

В.1 Общие требования

В.1.1 На все аппаратные средства, принадлежности, реагенты и расходные материалы комплекса для приготовления и окраски цитологических препаратов должны быть регистрационные удостоверения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития.

В.1.2 К оборудованию в обязательном порядке следует прилагать инструкцию на русском языке и подробное руководство пользователя.

В.1.3 Все компоненты оборудования (системы) должны быть приобретены у одного производителя либо производитель/поставщик должен предоставить официальные сведения о совместимости с оборудованием других фирм.

В.2 Приготовление и окрашивание препаратов при проведении цитологических исследований

В.2.1 Технология взятия и доставки биологического материала должна предоставлять возможность переноса на предметное стекло без потерь всего биологического материала, взятого у пациентки.

В.2.2 Срок годности консервирующей жидкости для гинекологического материала при хранении при комнатной температуре (от 15 до 30 °C) должен составлять не менее 32 мес со дня изготовления.

Взятие мазка на онкоцитологию

В.2.3 Срок хранения флакона с клеточным материалом при комнатной температуре должен составлять не менее 2 недель.

В.2.4 Оборудование должно предоставлять возможность получить готовый препарат как без содержания эритроцитов и слизи, так и при сохранении исходного их количества в препарате.

В.2.5 Транспортная жидкость, используемая для сохранения материала при транспортировании, не должна препятствовать проведению других видов исследования (ИЦХ, ПЦР и пр.).

В.2.6 При наличии в составе консерванта (транспортной жидкости) веществ, влияющих на выбор тактики при проведении дополнительных исследований, производитель или поставщик должны в письменном виде предоставить информацию, касающуюся этого вопроса, самостоятельно или по запросу пользователя.

В.2.7 Технология приготовления и окраски клеточного материала должна быть управляемой и допускать изменения в случае необходимости для подготовки препаратов из различного материала, в том числе негинекологического, жидкостей и пр.

В.2.8 Оборудование должно обеспечивать возможность:- управления объемом клеточной суспензии;- управления объемом переносимого на предметное стекло клеточного материала;- одновременного приготовления серии идентичных препаратов из одного материала в количестве не менее чем 12 шт. (от 1 до 12);- вносить изменения в ход работы и протоколы;

– обработки материала, не исключающей дальнейшего использования препарата как для традиционного цитологического исследования, так и для автоматизированного;- использования оставшегося после приготовления препаратов клеточного материала в других видах исследований;- приготовления нативных (неокрашенных) монослойных препаратов, не менее 90 в 1 ч;- приготовления окрашенных монослойных препаратов, не менее 40 в 1 ч.

Основные показатели цитологии шейки матки

Цитологический мазок подвергается микроскопическому исследованию.

Женщина смотрит в микроскоп

При этом определяется:

  • Наличие патогенной микрофлоры.
  • Количество эритроцитов и лейкоцитов.
  • Состояние цилиндрического эпителия.

Если количество и форма клеток не вызывает отклонений, исследование считается отрицательным, что является нормой.

Когда анализ показывает, что в клетках произошли морфологические изменения, с нарушением их структуры, такой результат считается положительным. В таком случае назначается повторный вид анализа в комплексе с дополнительными видами исследования.

Расшифровка цитологии шейки матки

Классификация цитологических изменений по Папаниколау:

  • 1 класс – отрицательный результат (норма – атипичные клетки отсутствуют, клетки имеют одинаковую форму и размер);
  • 2 класс – обнаружены морфологические изменения, появившиеся под влиянием воспаления влагалища или шейки матки;
  • 3 класс – есть подозрение на наличие злокачественного процесса, обнаружены единичные клетки с морфологическими аномалиями;
  • 4 класс – отдельные клетки с злокачественными изменениями;
  • 5 класс – обнаружены признаки злокачественных изменений ткани.

Приложение А(рекомендуемое)

Министерство здравоохранения

Российской Федерации

Медицинская документация

Форма N 203/у-02

Утверждена приказом Минздрава России
от 24.04.2003 N 174

Наименование учреждения

НАПРАВЛЕНИЕ
на цитологическое диагностическое исследование и результат исследования

ПЕРВИЧНО
ПОВТОРНО
(подчеркнуть)

1. Отделение

История болезни N

2. Лечащий врач (ФИО, тел.)

3. ФИО больного (полностью)

4. Дата рождения

Пол: м ( ), ж ( )

5. Страховая компания

N страхового полиса

Серия

6. Диагноз (при направлении на цитологическое исследование)

Код по МКБ-10

7. Краткий анамнез и важнейшие клинические симптомы:

8. Данные инструментального обследования (рентгенологического, УЗИ, КТ, эндоскопического и др.)

9. Проведенное лечение (оперативное, лучевое, химиотерапия; доза, дата начала и окончания лечения)

10. Локализация процесса и способ получения материала

11. Объем и макроскопическое описание биологического материала, маркировка препаратов

12. Дата взятия биологического материала

ФИО врача, направившего материал

Подпись врача

13. Объем и макроскопическое описание доставленного биологического материала (заполняют в лаборатории):

(Оборотная сторона)

Наименование цитологической лаборатории, телефон

Результат цитологического исследования N

Дата поступления материала

Дата проведения исследования

ФИО врача, проводившего исследование

Подпись

Прежде всего, расшифровка цитологического анализа состоит в оценке биологического материала (нормальное или неудовлетворительное качество). Если отмечено плохое качество мазка, то на бланке указывается причина. Как правило, это может быть наличие дополнительных примесей (эсскудата, крови, спермы). В таком случае следует взять повторный мазок на цитологию.

Беременная с сердечком

Существует 2 вида классификаций, использующихся при оценке результатов цитологического исследования мазка: классификация по Папаниколау и по системе Bethesda. На бланке мазка могут присутствовать обозначения обеих систем, так как это повышает диагностические возможности ПАП-теста.

Классификация результатов анализа, разработанная Георгисом Папаниколау, состоит из 5 классов, каждый из которых имеет свою оценку по количеству выявленных атипичных клеток.

Класс Характеристика
1 Результаты цитологических исследований соответствуют норме
2 Изменение морфологии клеток (повреждение структурного, мембранного аппаратов, ферментной системы) вследствие воспалительных процессов в репродуктивных органах женщины, далее проводят лечение и повторный ПАП-тест
3 Обнаруживается небольшое количество аномальных клеток с нарушенной структурой ядер и цитоплазмы. Далее используется биопсия и гистология
4 Обнаружены признаки злокачественных изменений (аномалии цитоплазмы, увеличение ядер). Требуется консультация и обследование у онкогинеколога
5 Выявлено большое количество раковых клеток, что свидетельствует о раке

Классификация цитологического исследования Bethesda System используется в странах СНГ параллельно с классами по Папаниколау, при этом в бланке анализа указывается оценка мазка по обеим классификациям. Преимущество новой системы в том, что присутствуют более детальные описания клеточных изменений на всех участках цервикального канала.

Наименование Расшифровка
NILM Мазок соответствует норме: в биологическом материале отсутствуют изменения и злокачественные клетки
ASC-US Плоский эпителий мазка содержит атипичные клетки
ASC-H Высокая вероятность злокачественных процессов, которые привели к изменению структуры клеток. Применяется расширенная кольпоскопия
L-SIL Выявлены не многочисленные доброкачественные изменения плоских клеток эпителия с низкой вероятностью развития раковых процессов. Требуется кольпоскопия, анализ на наличия ВПЧ и повторный ПАП-тест через год
H-SIL Немногочисленные изменения клеток злокачественного происхождения, вызванные дисплазией. Для дополнительных анализов используется биопсия или эксцизия с последующей гистологией, также необходимо проводить ПАП-тест каждые 6 месяцев на протяжении 2 лет для дальнейшего отслеживания динамики развития злокачественных процессов
Squamous cell carcinoma Плоскоклеточный рак
AGC-US В мазке обнаружены клеточные патологии железистого эпителия неясного происхождения
AGCfavorneoplastic Выявлено значительное количество аномалий железистого эпителия, подозрение на дисплазию. Требуется проведение кольпоскопии, анализа на ВПЧ
AIS Обнаружена эндоцервикальная карцинома, ранняя стадия опухоли злокачественного характера. Следует провести процедуры кольпоскопии, диагностической эксцизии, выскабливания
Adenocarcinoma Рак железистого эпителия

В результатах цитологического анализа также указывают наличие микроорганизмов, присутствующих в мазке. При этом микрофлора в цитологии не является объектом детального изучения, поэтому при наличии нарушений требуются дополнительные анализы.

В результатах ПАП-теста мазка шейки матки может быть указано присутствие следующих микроогранизмов:

  • вирус герпеса репродуктивных органов;
  • трихомонады (Trichomonas vaginalis);
  • хламидии;
  • бактерии, вызывающие актиномикоз (Actinomyces spp.);
  • кокковую флору при бактериальном вагинозе;
  • молочницу.

Также в бланке анализа на онкоцитологию может указываться такой результат, как дисплазия (неоплазия) шейки матки – изменение строения, размеров и многослойности клеток плоского эпителия. Другое название патологии – цервикальная интраэпителиальная неоплазия (CIN).

Различают три степени тяжести неоплазии:

  • CIN I (легкая степень) — патологические изменения выражены слабо и наблюдаются в первой трети эпителия, при этом поверхностный и промежуточный слои не изменены;
  • CIN II (умеренная степень) — патология с более выраженными клеточными изменениями, затрагивающими вторую треть эпителиальной ткани;
  • CIN III (выраженная форма) — поражается вся толщина эпителиального пласта и наблюдаются значительные структурные изменения клеток.

При обнаружении цервикальной интраэпителиальной неоплазии необходимо помнить, что предраковым состоянием считается только CIN III, при котором обязательно проводятся дополнительные исследования и лечение.

Как правило, при патологических изменениях при CIN I и CIN II не требуется лечения, если у женщины отсутствует вирус папилломы человека, мочеполовые инфекции и жалобы, а микрофлора влагалища в норме.

В половине случаев легкой и умеренной степени неоплазии эпителий шейки матки приходит в норму в течении двух лет. При этом следует проводить мазок на цитологию каждые 3-6 месяцев для отслеживания динамики неоплазии.

При расшифровке цитологического анализа нормой принято считать:

  • Врач делает записиОбнаруживаются клетки неизмененного цилиндрического эпителия.
  • Многослойные влагалищные клетки без нарушения своей структуры.
  • Небольшие изменения, которые могут говорить о начальном этапе воспаления в пределах нормы.
  • Малое количество лейкоцитов (до 15 единиц), кислотность составляет 4,0-4,5. Основная часть бактерий палочки Додерлейна.
  • Небольшие примеси слизи.
  • Плоский клеточный эпителий не превышает 10 единиц.
  • Степень чистоты вагины находится в пределах второй стадии.

Патологические изменения обнаруживаются, если в мазке наблюдаются следующие отклонения:

  • Увеличение показателя кислотности свыше 5,0.
  • Присутствие трихомонад, гонококов Нейсера, грибков рода candida, гарднерелл, хламидиий, папилломавируса свидетельствует о наличии инфекционной патологии.
  • Выявление сразу нескольких видов лактобактерий, на фоне повышения кислотности до 7,0, или если она становится щелочной, может свидетельствовать о начальной форме дисплазии. Степень влагалищной чистоты может переходить в третью или четвертую категорию.
  • Полное отсутствие лактобацилл, развитие щелочной среды, при большой концентрации клеток цилиндрического и плоского эпителия вызывают подозрение вероятного развития шеечной формы рака матки. Такие изменения чаще всего наблюдаются на фоне повышенного содержания лейкоцитов, с большими примесями слизи, и изменением чистоты влагалища до пятой степени.

Атипичными клетками принято считать, когда происходят следующие изменения в клеточной структуре:

  • Значительно увеличивается объём ядра.
  • Нарушается его конфигурация и окраска.
  • Появляются морфологические аномалии в цитоплазме.

Рекомендации врача

Следует отметить, что даже значительные отклонения не всегда дают основания для постановки диагноза указывающего на развитие онкологического процесса.

Чтобы достичь достоверной диагностики назначают:

  • Повторное проведение цитологии шейки матки.
  • Кольпоскопия в сочетании с биопсией.
  • Диагностическое выскабливание.
  • Полное исследование крови, с применением онкомаркеров.

При прохождении данного вида исследования положительный результат встречается довольно часто. Но это не всегда означает, что у женщины развивается онкопатология.

Очень часто положительный результат может свидетельствовать о наличии инфекционного процесса, который может возникать в результате заболеваний половой сферы, эрозии, или влагалищном дисбактериозе.

После проведенной терапии по поводу половых инфекций, повторный цитологический анализ обычно приходит в норму.

Чтобы установить окончательный диагноз, и исключить онкопатологию, обязательно назначается проведение кольпоскопии, биопсии, гистологии. Обязательно производится диагностическое выскабливание.

Помимо вышеперечисленных исследований женщине назначается противовоспалительная терапия с последующим прижиганием пораженных участков. При вирусном характере заболевания рекомендуется пройти полный курс терапии обоим партнерам. Это позволит избежать повторного инфицирования.

Цитология шейки матки и беременность

Цитологическое исследование препарата шейки матки

Прохождение этого теста в период вынашивания ребенка производится три раза:

  1. Первичный мазок берется при визите в женскую консультацию для постановки на учет.
  2. На 30 неделе тестирование производится вторично.
  3. Чтобы избежать заражения ребенка во время родов, цитологию проводят на 37 недели беременности.

Такая частота данного теста обуславливается тем, что в период беременности у женщин может наблюдаться гормональный дисбаланс, и как следствие это приводит к изменению влагалищной микрофлоры. Ослабленная иммунная система может являться благоприятным фактором для развития вагинальных кандидозов и других нежелательных последствий.

Беременные должны знать об особой важности проведения этого вида анализа, о том, что это безопасный вид диагностики, он выполняется стерильным инструментом и не может быть источником заражения для женщины.

Очень важно пройти ПАП — тест до наступления беременности. Если при его прохождении обнаруживается повышенное содержание лейкоцитов, эритроцитов, морфологически измененных клеток, беременность следует отложить. Её планирование допускается после проведения комплексной терапии, в случае, когда повторный анализ будет отрицательным.

Приложение В (рекомендуемое). Требования к оборудованию и реактивам, используемым для проведения жидкостной цитологии гинекологического материала (эпителий шейки матки)

Данная методика получила широкое распространение в странах Европы и России приблизительно с 2004 года.

Она отличается высокой степенью достоверности и легкостью проведения:

  • Проведение исследованияДля ее выполнения была разработана специальная щёточка. При выполнении цитологии шейки матки она вводится в область цервикального канала. Гинеколог совершает 3 вращательных движений по часовой стрелке, и два круговых движения против нее. Это позволяет, максимально качественно, осуществить забор шеечного содержимого.
  • Данная процедура не требует анестезии, по времени занимает не более 15 минут.
  • После этого содержимое вместе со щеточкой помещают в специальную пробирку-флакон. В ней содержится жидкий состав, который растворяет исследуемый материал, превращая его в однородную массу. Пробирки направляются на анализ в лабораторию.
  • В условиях лаборатории происходит фильтрация раствора, его центрифугирование. После этого, полученный осадок наносят на предметное стекло, и производят окраску, используя методику Папаниколау.
  • Микроскопическое исследование осуществляется аналогичным способом, как и при обыкновенном тесте на цитологию.

Результат является нормой, если в мазке присутствуют, в небольшом количестве, неизмененные клетки цилиндрического эпителия. В анализе не должны находиться включения мицелия грибов, папилломавирусов и других бактериальных инфекций.

Расшифрованный результат обычно выдается в срок, через 7 или 10 дней после взятия материала на исследование.

Этот вид анализа должен производиться не реже одного раза в год. Его надо делать, после того как женщина начинает нормальную половую жизнь. После 30 летнего возраста, Данный вид обследования Можно проходить один раз в три года.

Плюсы

Минусы

  • Мазки, по своему качеству, на порядок выше по сравнению с обычным методом. Это достигается из-за удаления примеси крови и слизи.
  • Методика обладает повышенной чувствительностью к типичным клеткам.
  • Исследуемый материал можно хранить длительное время. При необходимости можно производить повторное исследование.
  • Взятый материал можно использовать для любых других видов исследования (ВПЧ — тест)
  • Отсутствие дополнительной информации вследствие устранения примесей крови.
  • Из-за усиленной обработки собранного материала происходит клеточная деформация, что осложняет расшифровку мазка.
  • Технология жидкостного исследования производится на дорогостоящем оборудовании, это ограничивает распространенность данной методики. Такую технику могут закупать только хорошие областные центры или крупные лаборатории.

Г.1 Техническое оснащение лаборатории для проведения метода ЖЦ:- центрифуга лабораторная с качающимся ротором, приспособленным для центрифугирования пробирок диаметром 17 мм, объемом 15 мл, способная обеспечить центрифугирование 600 g;- “вортекс” для пробирок с плавной регулировкой скорости встряхивания от 100 до 3000 rpm;

– прибор для автоматического приготовления клеточной суспензии, выполняющий начальный процесс обогащения клеточной суспензии (состоящий в очистке суспензии от эритроцитов, детрита и элементов воспаления): перемешивание образца и его извлечение из пробирки с консервантом, затем нанесение образца на плотный реагент в пробирку для центрифугирования;

– аппарат для автоматической окраски препаратов – прибор для окрашивания образцов или эквивалент, который предназначается для обработки микропрепаратов, автоматического переноса клеточных образцов из пробирок для центрифугирования в осадочную камеру, помещаемую на предметное стекло для микроскопа, автоматически окрашивает и промывает каждый микропрепарат;

– рабочая станция для управления прибором или эквивалент: системный блок с предустановленным программным обеспечением, монитор, клавиатура, мышь;- аспиратор – система создания вакуума для удаления продуктов окрашивания: емкость, компрессор, комплект трубок не менее одного комплекта;- считыватель штрих-кода.

Г.2 Расходные материалы:- одноразовые пробирки из пластика диаметром 17 мм, вместимостью до 15 мл, с закручивающейся крышкой, выдерживающие центрифугирование при скорости 600 g;- одноразовые стерильные виалы с транспортной средой;- одноразовые стерильные цитологические щетки для забора материала с влагалищной части шейки матки;

– одноразовые стерильные цитологические щетки для забора материала из цервикального канала;- предметные стекла для микроскопии с адгезивным покрытием (например, D-полилизиновым) или без оного – в зависимости от конкретной методики;- набор одноразовых пастеровских пипеток для работы с жидкостью и клеточным осадком;

– при необходимости – пленка или покровные стекла для покрытия препаратов;- консервирующая (транспортная) жидкость;- красители, буферы, забуференная или дистиллированная вода, фиксаторы и спецрастворы в зависимости от способа окраски;- одноразовые наконечники для переноса и дозирования материала;- средство для промывания аппарата для автоматической окраски препаратов;- контейнер для сбора и утилизации отходов класса B.

Приложение Г (рекомендуемое). Перечень и краткая характеристика необходимого оборудования и расходных материалов, применяемых при использовании метода жидкостной цитологии

Если материал, использующийся для анализа, был взят не из шейки матки, а из цервикального канала, для его расшифровки врачами применяется метод Бетседа. При нем особенно важны расположение клеток и метаморфозы, с которыми столкнулось ядро.

Если анализ не выявил никаких отклонений, в его результатах не будет указано никаких специальных обозначений.

Обозначением HPV врачи покажут возможный вагиноз или койлоцитоз.

Если пациентка увидит в расшифровке пробы из цервикального канала CIN, значит, анализ показал у нее дисплазию шейки матки, а слово Carcinoma говорит об онкологическом заболевании шейки матки.

Приложение Д(справочное)

Таблица Д.1 – Системы оценки цитологических препаратов

Морфология

Система CIN

Папаниколау

Бетесда (1991)

Возрастная норма. Патологические изменения эпителия слизистой отсутствуют. Клеточный состав также в пределах нормы

Норма

Класс I

Негатив

Незначительные клеточные изменения

Незначительные клеточные изменения

Класс II

Доброкачественные клеточные изменения, воспаление, признаки различных инфекций, радиационные изменения, реактивные, репаративные

Плоскоклеточная атипия полиморфные изменения (воспаления, инфекции и т.п.)

Плоскоклеточная атипия полиморфные изменения (воспаления, инфекции и т.п.)

Класс II

ASCUS (АПНЗ) полиморфные изменения

Папилломавирусные изменения (койлоцитоз)

Папилломавирусные изменения (койлоцитоз)

Класс II

LSIL (Н-ПИП)

Слабая дисплазия

CIN I

Класс III

LSIL (Н-ПИП)

Дисплазия средней степени

CIN II

Класс III

HSIL (Н-ПИП)

Дисплазия высокой степени

CIN III

Класс III

HSIL (Н-ПИП)

Карцинома in situ (CIS)

CIN III

Класс IV

HSIL (Н-ПИП)

Инвазивный РШМ

Инвазивный РШМ

Класс V

Атипия клеток железистого эндоцервикального эпителия

Атипия клеток железистого эпителия, эндоцервикального эпителия

Атипия клеток железистого эпителия, эндоцервикального эпителия

Аденокарцинома

Аденокарцинома

Аденокарцинома

Аденокарцинома

Примечание – CIN (cervical intraepithelial neoplasia) – цервикальная интраэпителиальная неоплазия; ASCUS (atypical squamous cell of undetermined significance) – АПНЗ (атипия плоскоклеточная неопределенной значимости); LSIL (low-grade squamous intraepithelial lesions) – Н-ПИП (плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени выраженности); HSIL (high-grade squamous intraepithelial lesions) – В-ПИП (плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени выраженности).

  • Ультразвуковое исследование – проводится при помощи аппарата УЗИ, позволяет обнаружить изменения органов малого таза;
  • Гистеросальпингография (ГСГ) – способ обследования матки и маточных труб, при котором их полости заполняются контрастным веществом и проводится рентгеновское или ультразвуковое исследование. Позволяет обнаружить непроходимость и структурные изменения органов;
  • Гистероскопия – эндоскопическое исследование полости матки. Преимущество метода в том, что из диагностической может перейти в лечебную (позволяет выполнять небольшие хирургические вмешательства, например полипэктомию или биопсию);
  • Иммуногистохимический анализ – лабораторный метод определения необходимых клеток, при помощи маркированных антител;
  • Определение онкомаркеров в крови – веществ, которые выделяют опухолевые клетки и не встречаются в норме.

Рекомендации врачей

Все специалисты в области медицины (гинекологии и онкологии) утверждают, что данный вид анализа должен делаться один раз на протяжении года.

Это позволит выявить онкопатологию на раннем этапе развития. Только своевременное выявление этого заболевания позволит добиться полного выздоровления.

Цитология шейки матки позволяет определить женщин, которые входят в группу риска. Поставить их на учет и осуществлять наблюдение позволяющие следить за прогрессированием онкопроцесса.

Сколько дней делается анализ мазка на цитологию

Чтобы цитология не дала ложноположительный или ложноотрицательный результат, важно соблюсти ряд правил, с которыми пациентку обязательно ознакомит ее лечащий врач:

  • Перед процедурой нельзя осуществлять спринцевание;
  • Недопустимо принятие любых лекарственных препаратов местного действия;
  • Нельзя мочиться, как минимум, 3 часа перед анализом;
  • Нельзя вступать в интимную близость с мужчиной, как минимум, 2 дня перед анализом;
  • Необходимо дождаться, пока воспалительный процесс, сопровождающийся обильным выделением секрета, спадет, чтобы возросшее число лейкоцитов не оказало влияние на итоги цитологии.

Срок получения результатов анализа напрямую связан с клиникой, в которой он был сделан, и может варьироваться от 1 до 5 дней.

Сколько же стоит сдать такой тип анализа? Стоимость на этот вид исследования, в зависимости от региона России может составлять от 1000 до 3000 рублей. Для некоторых групп населения это большая цена, но учитывая, что цитология шейки матки назначается не чаще 1 раза в год, это приемлемая сумма. Особенно если учесть что это идет во благо для здоровья.

Введение

В настоящем стандарте реализованы основные нормативные положения документов [1]-[4].Настоящий стандарт разработан для внедрения в практику здравоохранения унифицированных алгоритмов проведения пробоподготовки, в том числе:- для метода жидкостной цитологии с целью оптимизации и систематизации деятельности лечебно-профилактических учреждений и специалистов в области раннего выявления и диагностики рака;

– эффективной и своевременной (ранней) диагностики и лечения опухолей, масштабной борьбы против рака на региональном, национальном и глобальном уровнях в целях увеличения выживаемости, снижения смертности от онкологических заболеваний;- обеспечения доступности лечения для пациентов, страдающих онкологическими заболеваниями.

1 Область применения

Настоящий стандарт разработан как руководство по организации и проведению диагностических мероприятий, в том числе с использованием метода жидкостной цитологии, для руководителей лечебно-профилактических учреждений, гинекологических отделений, женских консультаций, лабораторий, врачей-гинекологов, сотрудников женских консультаций, смотровых кабинетов, цитологических лабораторий.

Настоящий стандарт разработан в соответствии с настоятельными рекомендациями ВОЗ о мероприятиях по борьбе с онкологическими заболеваниями шейки матки.ВОЗ также настоятельно рекомендует обратить особое внимание:- на организацию материально-технического обеспечения и укомплектованность кадрами;- обеспечение соответствующего профессионального уровня сотрудников путем организации регулярного повышения квалификации для них и контроля качества диагностических мероприятий.

2 Термины, определения и сокращения

2.1.1 аспиратор: Прибор, предназначенный для аспирации – вакуумного забора надосадочной жидкости.

2.1.2 виала: Контейнер с герметичной крышкой, содержащий транспортную жидкость, предназначенный для хранения и транспортирования клеточного материала.

2.1.3 мазок: Препарат, приготавливаемый путем нанесения и равномерного распределения (размазывания) биологического материала.

2.1.4 ПАП-тест: Данный тест является методом цервикального скрининга и используется для обнаружения потенциально предраковых и раковых процессов в шейке матки или цервикальном канале. Тест был изобретен Георгиосом Папаниколау и назван в честь этого греческого врача. Подразумевает оценку полученного материала по системе Bethesda.

_______________

Система Bethesda (TBS) представляет собой систему для оценки цитологической картины материала, полученного при биопсии шейки матки, и для формирования цитологического диагноза. Она была введена в 1988 г., и пересмотрена в 1991 и 2001 гг. Название происходит от места (Бетесда, Мэриленд) проведения конференции, на которой была утверждена к применению эта система.

2.1.5 транспортная жидкость: Специальная жидкость, использующаяся в жидкостной цитологии для сохранения и/или транспортирования материала. Как правило, представляет собой изотонический раствор с консервантами, фиксирующий и предохраняющий клетки от быстрого распада.

2.1.6 цитощетка: Щеточка для получения эндоцервикальных образцов.

2.1.7 сervex-brush: Щеточка для получения биоматериала из Т-зоны (зоны трансформации шейки матки) и влагалищной части шейки матки.

2.1.8 ID (identification): Уникальный идентификатор, который присваивается системой каждой отдельной записи или каждому пациенту.

2.2 СокращенияВ настоящем стандарте использованы следующие сокращения:аденокарцинома – АК;Всемирная организация здравоохранения – ВОЗ;жидкостная цитология – ЖЦ;иммуноцитохимия – ИЦХ;информационная система – ИС;лабораторная информационная менеджмент-система – ЛИМС;лабораторная информационная система – ЛИС;

7 Лабораторный этап

7.1 Общие положенияНа все оборудование, принадлежности, реагенты и расходные материалы для пробоподготовки цитологических препаратов должны быть представлены регистрационные удостоверения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития.

7.1.1 Все компоненты оборудования/систем должны быть приобретены у одного производителя, либо производитель/поставщик должен предоставить официальные сведения о совместимости с оборудованием других фирм.

7.1.2 К оборудованию в обязательном порядке следует прилагать инструкцию на русском языке и подробное руководство пользователя.

7.1.3 Все используемые реактивы для обработки и окраски биологического материала должны соответствовать срокам годности.

7.1.4 Сотрудник лаборатории (из числа среднего медицинского персонала) допускается к осуществлению пробоподготовки по методу ЖЦ после соответствующего распоряжения заведующего лабораторией.

7.1.5 Сотрудник, допускаемый к работе по методу ЖЦ, должен быть предварительно подготовлен и обучен работе с приборами у производителя (или его уполномоченного представителя).

7.1.6 Сотрудник, допускаемый руководителем лаборатории к работе, в том числе по методу ЖЦ, должен быть обучен методам контроля информативности материала путем микроскопии окрашенных препаратов.

7.1.7 Следует обратить внимание на перечень характеристик рекомендованного к использованию оборудования для ЖЦ (см. приложения В и Г).

7.1.8 Для пробоподготовки материала с ШМ, производящегося с целью выявления и ранней диагностики рака методом ЖЦ, использование цитоцентрифуг нецелесообразно.

7.1.9 Каждая лаборатория составляет внутренний документ – “Инструкцию по подготовке материала для исследования методом ЖЦ”.

7.1.10 В данном документе подробно, по пунктам, расписывают весь процесс приготовления препаратов на основе ЖЦ для данной лаборатории с указанием конкретного оборудования, в соответствии с рекомендациями производителя оборудования, используемого в лаборатории.

7.1.11 В инструкции указывают, в том числе фирменные названия приборов, материалов, реагентов (названия растворов, включая фирменные, позволяющие их однозначно идентифицировать), номеров и/или названий программ, запускаемых на автоматических приборах, описание конкретных методик окраски, применяемых в данной лаборатории, названия форм и бланков, заполняемых в процессе выполнения методики.

Инструкция должна содержать следующие пункты:- назначение процедуры;- описание процедур;- сбор материала;- приготовление окрашенных цитологических препаратов методом ЖЦ.Приложением к данной инструкции должны служить:- перечень сотрудников, допущенных к работе по этому направлению (с указанием должностей сотрудников, принимающих участие в пробоподготовке и диагностике);

7.1.12 Документ подписывает заведующий лабораторией; копии хранятся на рабочих местах непосредственных исполнителей методик.

7.2 Пробоподготовка

7.2.1 Материал для проведения исследования должен быть доставлен в лабораторию на маркированных предметных стеклах, а в случае использования метода ЖЦ – в маркированной емкости (виале) с транспортной жидкостью, количество которой варьирует в зависимости от объема и производителя виалы.

7.2.2 Пробоподготовку в рамках ЖЦ из доставленного в лабораторию материала в виалах необходимо произвести не позднее срока, указанного производителем. Например, не позднее четырех недель после получения материала, находящегося при комнатной температуре от 15 до 30°С; при температуре холодильной камеры от 2 до 10°С можно обрабатывать материал в течение полугода.

7.2.3 Этапы пробоподготовки (если производителем оборудования не предусмотрено иное):_______________ Аналогично ГОСТ Р 57005 (см. подраздел 7.3).

7.2.3.1 содержимое виал перемешать;

7.2.3.2 консервирующую жидкость налить с помощью пипетки в пробирки для центрифугирования (~ 1/3 части пробирки);

7.2.3.3 для приготовления клеточной суспензии материал (~1/3 часть пробирки) перенести из виалы в пробирку в консервирующую жидкость (использовать аппарат для приготовления клеточной суспензии типа BD PrepMate™);

7.2.3.4 пробирки поместить в центрифугу и центрифугировать в щадящем режиме (при 200 rcf, 2 мин);_______________ Relative centrifugal force – относительная центробежная сила, выражается в единицах g (гравитационная постоянная).

7.2.3.5 с помощью аспиратора убрать надосадочную жидкость и центрифугировать (при 800 rcf, 10 мин);

7.2.3.6 слить надосадочную жидкость полностью, резким движением перевернув штатив с пробирками на 180°;_______________ В дальнейшем слитую жидкость утилизировать в соответствии с правилами обращения с отходами категории В.

7.2.3.7 с помощью “вортекс” перемешать образовавшийся клеточный осадок (~15 с);

7.2.3.8 перенос полученного клеточного осадка на предметные стекла проводить в соответствии с процедурой, установленной производителем оборудования;

7.2.3.9 аппарат для приготовления и окрашивания препаратов использовать в соответствии с руководством производителя оборудования;

7.2.3.10 приготовить препараты;

7.2.3.11 предметные стекла с нанесенным биоматериалом после окрашивания (если использовалось окрашивание по Папаниколау) промыть спиртом [опустив в емкость со спиртом или сливая спирт из пипетки (выше монослоя)]. Можно использовать специальный спрей для фиксации;

7.2.3.12 подсушить препарат;

7.2.3.13 подготовить покровные стекла необходимого размера;

7.2.3.14 на препарат в центр монослоя нанести монтирующую среду;_______________ Главное требование к монтирующей среде – соответствие ее коэффициента преломления света к аналогичному показателю стекла. Виды монтирующих сред: канадский бальзам, глицерин-желатин, синтетическая, на основе полистирола и др.

7.2.3.15 заключить препарат под покровное стекло/пленку;

7.2.3.16 монтировать вручную покровное стекло следующим образом:- приложить покровное стекло ребром под углом к препарату и опустить, избегая образования воздушных пузырей,- при необходимости слегка нажать на покровное стекло, удалить излишки монтирующей среды (с помощью ваты/марли со спиртом/ксилолом),- дать препарату подсушиться (время зависит от монтирующей среды);

7.2.3.17 использовать автоматизированные приборы для заключения препаратов под покровное стекло или пленку в соответствии с руководством производителя оборудования;

7.2.3.18 препараты, приготовленные традиционным способом, окрашивают теми же методами, что и препараты, приготовленные в рамках метода ЖЦ.

7.3 Хранение биоматериала

7.3.1 Нативный жидкостной биоматериал без добавления консервантов или транспортной жидкости, доставленный в лабораторию или оставшийся после взятия для исследования, можно хранить в холодильной камере при температуре от 2 до 10°С не более 4 ч.

7.3.2 Биоматериал в транспортной среде в комнатных условиях при температуре от 15 до 30°С можно хранить не более 4 недель, если иное не предусмотрено производителем транспортной среды или консерванта.

7.3.3 Биоматериал в транспортной среде можно хранить в холодильной камере при температуре от 2 до 10°С не более 6 мес, если иное не предусмотрено производителем транспортной среды или консерванта.

7.3.4 Окрашенные препараты, по которым выявлена онкопатология или предопухолевые изменения, необходимо хранить в комнатных условиях (при температуре от 15 до 30°С) в течение срока, установленного данным лечебным учреждением, но не менее 10 лет.

7.3.5 Окрашенные неинформативные препараты при температуре от 15 до 30°С необходимо хранить 2 недели (для контроля качества).

7.3.6 Транспортную среду при температуре от 15 до 30°С хранить не более 36 мес (если производителем реагентов не предусмотрено иное).

7.3.7 Нативный биоматериал, поступивший в лабораторию на предметных стеклах, можно хранить в сухом помещении без ограничений до момента использования.

7.3.8 Утилизацию отходов осуществляют в соответствии с требованиями действующих нормативных документов [5], а также инструкциями к приборам, реагентам и расходным материалам, использующимся для приготовления препаратов методом ЖЦ в данной лаборатории.

7.4 Диагностический этап

7.4.1 Подготовленные к просмотру препараты в сопровождении направления в установленном порядке отправляют на диагностику.

7.4.1.1 К диагностике материала, приготовленного любым методом, допускается только персонал, прошедший обучение и допущенный на этом основании к работе руководителем лаборатории с оформлением соответствующего распоряжения (приказа) по лаборатории.

7.4.2 Для адекватной оценки препарата необходимо системно произвести просмотр всего клеточного материала (см. рисунок 5), а затем дать оценку качества препарата и его информативности.

Рисунок 5 – Наиболее эффективная схема направления просмотра препарата

7.4.3.1 о качестве препарата, его информативности;

7.4.3.2 о том, какое количество препаратов оценивают (описывают);

7.4.3.3 о причине, по которой препарат оценен исследователем как неинформативный или малоинформативный (при неинформативном или малоинформативном материале);

7.4.3.4 на предмет диагноза с указанием кода по МКБ-10 или описания препарата при невозможности выставления однозначного диагноза;

7.4.3.5 о причине, по которой исследователь счел невозможным указать точный диагноз;

7.4.3.6 в отношении рекомендаций по проведению дополнительных исследований или по повторному получению материала, если это необходимо для установления диагноза;

7.4.3.7 о дате исследования и ФИО выдавшего заключение.

7.5 Формулирование заключенияПри оценке результатов цитологического исследования возможно использование классификации Папаниколау, Бетесда или традиционной, классической морфологической классификации (см. приложение Д).

Библиография

[1]

Руководство ВОЗ “Комплексная борьба с раком шейки матки: руководство по основам практики – 2 издание” (WHO, Comprehensive cervical cancer control: a guide to essential practice – 2nd ed)

[2]

Международная статистическая классификация болезней и проблем, связанных со здоровьем – 10-й пересмотр (International Statistical Classification of Diseases and Related Health Problems – Teath Revision – Volume 3. Alphabetical Index)

[3]

ВОЗ, Классификация опухолей женских репродуктивных органов [WHO Classification of Tumours of the Female Reproductive Organs (IARC WHO Classification of Tumours) Fourth Edition]

[4]

Цитологическая классификация Бетесда (Cytology classification. The Bethesda System 2014)

[5]

СанПиН 2.1.7.2790-10 “Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами”

УДК 616-006-072/-079:618.146(083.74)

ОКС 03.040, 11.040.01, 11.100.01

Ключевые слова: диагностика в онкологии, алгоритм диагностики, шейка матки, лабораторный этап

Электронный текст документаподготовлен АО “Кодекс” и сверен по:официальное изданиеМ.: Стандартинформ, 2016